新型鸭坦布苏病毒病亚单位疫苗的研究

摘要：

为评价真核表达的鸭坦布苏病毒(DTMUV)融合表位蛋白的免疫原性,本研究通过生物信息学技术,对DTMUV E蛋白序列进行分析,筛选2段T细胞表位和8段B细胞表位,采用柔性肽将10条多肽进行拼接,人工合成串联表位基因,利用杆状病毒表达系统对该融合表位蛋白(rTBE)进行表达.经western blot和间接免疫荧光试验证明rTBE能够在在Sf9细胞中有效表达.重组蛋白经镍柱纯化,并采用Al(OH)3乳化(0.1μg/mL),分别以0.3 mL、0.6 mL和0.8 mL的剂量免疫雏鸭,ELISA抗体检测结果表明,rTBE可以诱导雏鸭产生高水平的IgG血清抗体;MTT结果表明,rTBE能够刺激雏鸭脾脏T淋巴细胞增殖;中和抗体试验结果表明,表达的rTBE和DTMUV病商品活疫苗均能够刺激机体产生针对DTMUV的中和抗体.Al(OH)3对照组雏鸭均未产生IgG血清抗体与中和抗体.攻毒保护试验结果显示,0.3 mL rTBE免疫组对雏鸭的保护率为70％,0.6 mL、0.8 mL和商品化疫苗免疫组对雏鸭的保护率均为100％,而Al(OH)3对照组雏鸭均表现为典型的DTMUV感染症状,其中4只死亡.以上结果表明,本研究预测及表达的DTMUV E蛋白融合表位蛋白rTBE具有免疫原性及保护力.以上研究结果为DTMUV新型亚单位疫苗的研究奠定了基础.

关键词：鸭坦布苏病毒、融合表位蛋白、免疫原性、保护效果、亚单位疫苗

所属期刊栏目：43

分类号：S852.4(动物医学（兽医学）)

资助基金：江苏省科技计划重点及面上项目;徐州市推动科技创新专项资金项目;徐州市科技局重点研发计划现代农业项目

在线出版日期：2021-03-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：71-76