重组酶聚合酶扩增技术快速检测鲤春病毒血症病毒(SVCV)方法的建立

摘要：

为建立鲤春病毒血症病毒(SVCV)的快速检测方法,本研究根据SVCV的G基因保守序列设计特异性引物,通过条件优化初步建立了基于重组酶聚合酶扩增技术(RPA)的SVCV检测方法.该RPA方法最优扩增温度为30℃,恒温反应20min内即可完成.特异性试验结果显示,该方法与其它常见鱼类感染病毒无交叉反应;敏感性试验结果显示,该方法对SVCV质粒标准品的最低检出限为89.2拷贝/μL,高于传统的RT-PCR方法;利用已建立的RPA方法和RT-PCR方法对市场购买的80份临床样品进行检测,结果显示,RPA方法与RT-PCR方法检测结果一致,且RPA方法能够有效检出RT-PCR方法的弱阳性样品,表明RPA方法可以用于临床检测.本研究建立的检测SVCV的RPA方法具有快速、简便、特异性强、灵敏度高的特点,适合基层实验室及现地检测.

关键词：重组酶聚合酶扩增技术、快速检测、鲤春病毒血症病毒

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分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重点研发计划2017Y FF0211103;国家质量监督检验检疫总局科研项目2017IK 232

在线出版日期：2019-12-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1037-1040