副结核分枝杆菌MAP1068胞外蛋白酶的特性研究

摘要：

为研究副结核分枝杆菌(MAP) 1068蛋白的特性,本研究以MAP参考株K10基因组为模板,PCR扩增其map1068基因,构建pET28a-map1068重组载体,将其转化BL21后诱导表达并纯化MAP1068蛋白.利用纯化的重组蛋白免疫(100 μg/只/0.1 rnL)小鼠制备多克隆抗体,应用该抗体对MAP1068蛋白进行亚细胞定位.以酪蛋白为底物测定MAP1068蛋白的酶活性.结果 显示,MAP1068蛋白以包涵体形式表达;经变性、复性、亲和层析纯化后获得目的蛋白;将该蛋白免疫小鼠后其血清抗体效价可达1∶204 800;该蛋白主要定位于MAP细胞壁,可降解酪蛋白,为胞外蛋白酶.本实验为进一步研究MAP的致病机制奠定了基础.

关键词：副结核分枝杆菌、MAP1068、特性、酶活性

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分类号：S852.61(动物医学（兽医学）)

资助基金：牛羊重要疫病免疫防控新技术研究/牛羊疫苗新型佐剂及工艺研究2017YFD0500906;黑龙江省青年科学基金项目QC201834

在线出版日期：2019-08-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：505-508