副猪嗜血杆菌及巴氏杆菌双重荧光定量PCR检测方法的建立

摘要：

为建立副猪嗜血杆菌(Hps)、多杀性巴氏杆菌(Pm)的双重荧光定量PCR检测方法,本研究基于Hps的OmpP2基因,Pm的PlpE基因设计两对特异性引物及探针,通过对反应条件优化,建立了一种同时检测Hps及Pm的双重荧光定量PCR方法.该方法能够特异性地检测Hps和Pm,其对重组质粒标准品的最低检测浓度分别为5.60×102拷贝/μL、7.58×102拷贝/μL.双重与单一荧光定量PCR最低检测限相同,且均是常规PCR的100倍.重复性试验结果显示,该方法的组内和组间变异系数均小于2.5％.临床应用结果显示:该方法对阳性样品的检出率为53.57％,明显优于常规PCR和细菌分离鉴定.该方法能够用于两种疾病的同时检测和快速排查疾病.为两种疾病的防治提供有效检测工具.

关键词：副猪嗜血杆菌、巴氏杆菌、双重荧光定量PCR

所属期刊栏目：41

分类号：S852.61(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家农业产业技术体系四川兽药创新团队专项

在线出版日期：2019-08-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：489-494