动物A型流感病毒RPA-LFD可视化检测方法的建立

摘要：

为建立动物A型流感病毒(Ⅳ)的重组酶聚合酶扩增-侧流层析试纸条(RPA-LFD)检测方法,本研究针对A型Ⅳ基质蛋白(M)基因保守序列设计了引物和探针,通过反应条件优化,建立了RPA-LFD检测方法.特异性试验结果显示,该方法检测动物A型Ⅳ呈阳性,与新城疫病毒、鸭坦布苏病毒、鸭肝炎病毒、小鹅瘟病毒等无交叉反应,特异性强;反应时间短、敏感性高,可以在35℃,20 min内检测到最低浓度为10拷贝/μL的重组质粒标准品.利用该方法对从化某活禽市场分离的鸭咽拭子样品共50份进行检测,结果3份为阳性,其余均为阴性,与PCR及病毒分离结果一致,准确性高.本研究首次建立了检测动物A型Ⅳ的可视化RPA-LFD检测方法,该方法不依赖任何仪器设备,操作简单、快速,可为基层实验室临床快速检测和流行病学研究提供帮助.

关键词：重组酶聚合酶扩增、侧流层析试纸条、A型流感病毒

所属期刊栏目：41

分类号：S852.61(动物医学（兽医学）)

资助基金：广东省家禽产业体系2017LM1113;广东省科技计划2017A020208069;广州市科技计划201804010412;广东省自然科学基金2018A030313630

在线出版日期：2019-08-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：474-478