利用信息肽诱导和Cre/LoxP系统构建猪链球菌基因缺失株

摘要：

为建立一种高效的猪链球菌(Streptococcus suis)基因缺失方法,本研究利用信息肽诱导DNA片段转化和Cre/LoxP系统去除抗性基因这两种技术,通过在S.suis 05ZYH33的ssu05 1921基因上、下游片段和壮观霉素抗性基因(spc)片段之间引入LoxP位点,采用信息肽GE9诱导构建的DNA片段转化S.suis并发生重组,经抗性筛选快速获得spc替代ssu05_1921基因的缺失株;进一步引入pSET6s/PtufA-cre质粒表达Cre重组酶作用于LoxP位点,去除spc基因,产生无痕ssu05_1921基因缺失株,经测序和RT-PCR验证缺失正确.本研究建立的该方法简单、快捷、阳性率高,为构建S.suis基因缺失株、研究S.suis致病机制提供了新的选择.

关键词：猪链球菌、信息肽诱导、Cre/LoxP系统、基因缺失

所属期刊栏目：41

分类号：S852.61(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重点研发计划2017YFD0500203;国家自然科学基金31772757、31500112;黑龙江省自然科学基金C2017075

在线出版日期：2019-05-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：125-130