流行性乙型脑炎病毒E蛋白多表位肽在毕赤酵母中分泌表达及其免疫原性研究

摘要：

为构建流行性乙型脑炎病毒(JEV)E蛋白多表位疫苗,本研究将人工合成的优化后的E蛋白多表位肽(MP)序列克隆入酵母表达载体pPICZα-A,构建分泌型重组酵母表达质粒pPICZ-MP,经Sac Ⅰ酶切线性化后电转化导入毕赤酵母X-33,阳性重组子经甲醇诱导表达,亲和层析纯化重组蛋白(rMP).通过测定rMP免疫小鼠的抗体水平、抗体亚型、中和抗体和CTL,以评价该多表位疫苗在小鼠模型上的免疫原性.结果表明:成功构建了表达JEV E蛋白多表位抗原的重组酵母菌株X33 (pPICZ-MP),能分泌表达多表位肽rMP.纯化后的rMP免疫小鼠产生了较强的体液免疫和细胞免疫反应,其中和抗体水平、CTL活性均与活病毒疫苗组差异不显著(p＞0.05),且能保护小鼠免受致死量JEV的攻击.构建的JEV E蛋白多表位疫苗具有良好的免疫原性,能够刺激小鼠产生特异性的细胞免疫和体液免疫应答反应,为流行性乙型脑炎多表位疫苗研制提供新的思路.

关键词：流行性乙型脑炎病毒、多表位疫苗、毕赤酵母、免疫原性

所属期刊栏目：39

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金31302116;公益性行业农业科研专项201203082

在线出版日期：2017-08-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：485-489,507