猪丁型冠状病毒重组N蛋白间接ELISA抗体检测方法的建立

摘要：

猪丁型冠状病毒(PDCoV)是2014年检测出的一种新型猪源肠道冠状病毒,对养殖业造成严重的经济损失.为建立快速检测PDCoV的血清学方法,本研究以原核表达的PDCoV N重组蛋白为包被抗原,通过反应条件优化,建立了一种PDCoV重组N蛋白的间接ELISA抗体检测方法.结果显示,原核表达的PDCoV重组N蛋白约为28 ku,western blot证实表达蛋白具有良好的反应原性;以其作为包被抗原建立的PDCoV抗体间接ELISA方法仅对PDCoV血清检测为阳性,与猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪繁殖与呼吸系统综合征病毒等7种主要猪源病毒阳性血清均无特异性反应,具有良好的特异性.该方法检测灵敏度较高、重复性好,批内和批间重复性变异系数均小于10％;采用该ELISA方法对我国2014年～2016年间采集的不同地区猪场的100份临床血清样品进行了检测,阳性率高于45.9％,表明我国猪群中存在PDCoV感染.本实验建立的ELISA方法可以用于检测临床样品中的PDCoV抗体,是PDCoV流行病学调查的一种有效工具,对该病的防控具有重要意义.

关键词：猪丁型冠状病毒、N蛋白、原核表达、间接ELISA

所属期刊栏目：39

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：江苏省农业科技自主创新资金CX15 1056

在线出版日期：2017-08-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：461-465