鸡毒支原体S6株P25蛋白粘附特性的研究

摘要：

鸡毒支原体(MG)粘附蛋白是MG定植于宿主细胞表面的关键因子,并在MG致病过程中发挥着重要作用.为筛选并鉴定MG新的粘附蛋白,本研究根据生物信息学软件对MG S6基因组全部序列进行分析,选取了MG的一个假定膜蛋白基因,其大小为675 bp(编码225个氨基酸,分子量约25 ku,将其命名为P25).通过MG膜蛋白组分的提取及western blot鉴定,结果显示P25分布在MG膜的表面.利用PCR扩增MG p25基因并通过定点突变将其序列中TGA终止密码子突变为TGG(编码色氨酸),通过原核表达其编码的重组P25蛋白(rP25),并以rP25作为免疫原免疫兔子制备高免血清.激光共聚焦显微镜观察显示rP25和MG均对鸡胚成纤维细胞系(DF-1)具有明显的粘附作用,而ELISA和流式细胞仪检测结果则表明rP25和MG对DF-1细胞的粘附为特异性粘附,其中rP25抗血清可以明显抑制rP25和MG对DF-1细胞的粘附作用,从而证明P25为MG的一个粘附相关蛋白.

关键词：鸡毒支原体、DF-1细胞、激光共聚焦、ELISA、流式细胞仪

所属期刊栏目：38

分类号：S852.62(动物医学（兽医学）)

资助基金：2015兽医生物技术国家重点实验室动物支原体创新团队经费

在线出版日期：2016-03-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：105-110