稳定表达猪传染性胃肠炎病毒N蛋白的ST细胞株的构建及其亚细胞定位

摘要：

为研究猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)N蛋白的表达对宿主细胞功能的影响,本研究通过构建TGEVN基因的重组表达质粒pEGFP-N,将其转染于猪睾丸(ST)细胞中,并在活细胞状态下直接观察GFP-N蛋白在ST细胞中的表达与定位.结果显示,转染后4h～5h出现荧光蛋白表达,24 h达到高峰,TGEV的N蛋白主要定位于细胞质中,进一步的激光共聚焦共定位显示TGEV N蛋白主要定位于ST细胞的内质网上面.以G418筛选4周后,转染细胞形成稳定的细胞株,RT-PCR和western blot验证TGEV N蛋白的mRNA及其蛋白在ST细胞中稳定表达,提示本研究建立了稳定表达的TGEV N蛋白的ST细胞株,为进一步研究TGEV N蛋白对ST细胞的生理功能的影响及其在TGEV致病过程中的作用奠定了基础.

关键词：猪传染性胃肠炎病毒、N蛋白、亚细胞定位、细胞株

所属期刊栏目：38

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金31302105;河南科技大学博士生基金9001732

在线出版日期：2016-03-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：101-104