无痕基因敲除技术构建鼠伤寒沙门菌luxS基因突变株

摘要：

为验证一种基于定点突变的无痕基因敲除技术(Scarless deletion)在鼠伤寒沙门菌中的有效性,本研究以鼠伤寒沙门菌中的luxS基因为靶基因,利用-Red重组酶和重叠延伸PCR(SOE-PCR)引入定点突变,以AAA代替luxS基因的起始密码ATG,改变luxS基因编码序列,通过测序验证并采用2型自诱导物(AI-2)试验检测是否有信号分子产生.基因测序结果显示luxS基因的起始密码ATG被引入的AAA代替;AI-2试验未检测到突变基因菌株的AI-2产物,而对照的野生菌株有AI-2产生,表明突变基因失活,方法有效.利用无痕基因敲除技术构建突变株简单快速,并且不影响被突变基因的另一条DNA单链序列,具有广泛的应用前景.

关键词：无痕基因敲除、鼠伤寒沙门菌、luxS基因

所属期刊栏目：38

分类号：S852.61(动物医学（兽医学）)

资助基金：教育部新世纪优秀人才支持计划NCET-11-1071;新疆生产建设兵团"兵团英才"项目

在线出版日期：2016-03-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：23-26,30