稳定表达施马伦贝格病毒核衣壳蛋白的BHK-21细胞系的建立

摘要：

为建立稳定表达施马伦贝格病毒(SBV)核衣壳(N)蛋白的BHK-21细胞系,本研究在SBV-N蛋白编码基因的C端加入6个组氨酸(6 ×His)标签,将其克隆至慢病毒载体pLV-EGFP-C中构建重组慢病毒质粒pLV-EGFP-SBV-N,将其与慢病毒包装质粒pHelperl.0和pHelper2.0共转染HEK-293T细胞,包装表达SBV-N蛋白的慢病毒.将重组慢病毒在聚凝胺(Polybrene)的介导下感染BHK-21细胞,采用嘌呤霉素(Puromycin)法和细胞有限稀释法筛选出一株稳定表达SBV-N蛋白的BHK-21细胞系,命名为BHK-21-EGFP-SBV-N.间接免疫荧光试验进一步表明,该细胞系能够被SBV抗体阳性动物血清和特异性单克隆抗体2C8识别.稳定表达SBV-N蛋白的BHK-21细胞系的建立,为SBV血清学检测方法的建立提供材料.

关键词：施马伦贝格病毒、核衣壳蛋白、B HK-21细胞、慢病毒载体

所属期刊栏目：37

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：“十二五”国家科技支撑计划课题2013BAD12B01;中国检验检疫科学研究院“青年英才计划”项目CAIQ-YC-20140205;国家质检总局科技计划项目2013IK054

在线出版日期：2015-07-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：438-443