口蹄疫病毒非结构蛋白3B单克隆抗体(MAb)的制备及基于MAb ELISA方法的初步建立

摘要：

为建立区分口蹄疫病毒(FMDV)疫苗免疫和自然感染动物的血清学鉴别检测方法,本研究采用杆状病毒表达的FMDV非结构蛋白3ABC免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,并以原核表达的FMDV非结构蛋白3B作为抗原筛选融合细胞的培养上清液,获得一株稳定分泌抗3B蛋白单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞.经间接免疫荧光鉴定其为一株抗FMDV非结构蛋白3B的特异性MAb,为IgG1/κ亚类,间接ELISA检测杂交瘤细胞上清液和腹水的抗体效价分别为1∶12 800和1∶106.硫氰酸盐洗脱法测定其相对亲和力常数为1.5 mol/L.采用该MAb作为包被抗体并特异性的结合原核表达的3B重组蛋白用于检测血清中抗FMDV的非结构蛋白抗体,初步建立了以MAb为基础的ELISA方法.其MAb包被浓度为5μg/mL,3B重组蛋白浓度为1.1 μg/mL,被检血清1∶100稀释,通过检测猪血清并与3B间接ELISA和prioCHECK(R)NSP ELISA试剂盒进行比较,表明该方法具有更强的特异性.

关键词：口蹄疫病毒、3B重组蛋白、MAb、ELISA

所属期刊栏目：36

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项0302013012

在线出版日期：2014-08-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：448-452