禽网状内皮组织增生症病毒env基因的原核表达及其多克隆抗体制备

摘要：

为原核表达禽网状内皮组织增生症病毒(REV)env蛋白及制备抗env蛋白的高效价多克隆抗体,本研究以pMD18T-env(HLJR0901株)为模板,扩增得到REV的env全长基因,将其克隆于pET-32a(+)中.将阳性重组质粒pET-env转化E.coli BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达.利用亲和层析纯化重组蛋白,复性后免疫BALB/c小鼠,制备抗env多克隆血清.SDS-PAGE及western blot结果表明,env基因以融合蛋白形式获得正确表达,相对分子质量约为84 ku,表达产物具有良好免疫原性;IFA结果显示,制备的抗env多克隆血清能与REV野毒株特异性反应;ELISA效价达到1:105以上.该研究为REV的检测及env蛋白的深入研究奠定了基础.

关键词：禽网状内皮组织增生症病毒、env基因、原核表达、纯化、多克隆抗体

所属期刊栏目：32

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：现代农业肉鸡产业技术体系建设nycyts-42-G3-01

在线出版日期：2010-12-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：812-814