产肠毒素性大肠杆菌F41与987P菌毛蛋白的串联表达

摘要：

根据GenBank中发表的E.coliF41、987P基因序列,分别设计合成一对引物.利用PCR技术,分别以大肠杆茵C83707的基因组和C83710的质粒为模板扩增F41、987P基因.通过分离、纯化、限制性核酸内切酶酶切、连接和转化,构建了含F41-987P串联表达载体的重组菌株BL21(DE3)/pETF41-987P.经酶切、PCR鉴定和DNA序列分析,证实了构建的重组质粒pETF41-987P中含有F41-987P融合基因,且基因序列和阅读框架均正确.经过SDS.PAGE分析,串联表达蛋白含量在30%左右,经Western blot检测,该串联表达蛋白能被大肠杆茵F41、987P阳性血清识别.反向间接血凝试验结果,F41效价为26～28,987P效价为28～210.说明F41-987P融合蛋白具有良好的抗原性.表明构建的重组菌株可以作为预防新生仔猪大肠杆菌性腹泻基因工程疫苗的候选菌株.

关键词：大肠杆菌、987P、F41、串联表达

所属期刊栏目：30

分类号：S852.612(动物医学（兽医学）)

在线出版日期：2008-06-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：271-274