外周血中抗EV71VP1特异性抗体分泌细胞检测方法的建立

摘要：

目的 应用酶联免疫斑点(ELISPOT)技术,建立一种检测外周血中抗EV71 VP1特异性抗体分泌细胞的方法,并评价该方法 在检测EV71感染诊断中的应用价值.方法 无菌分离外周血中单个核细胞,建立一系列特异性ELISPOT检测外周血VP1抗原特异性抗体分泌细胞的参数:包括抗原最佳包被浓度、反应体系中细胞浓度以及HRP标记抗体工作浓度的确定,与ELISA比较,检测方法 的敏感性和特异性.结果 当抗原包被浓度为20 μg/mL时,不同细胞浓度反应曲线最稳定;细胞浓度为5X106/mL时,不同包被浓度形成的斑点数适量,易于计数;HRP标记抗体释稀度为1:10 000时,背景最浅容易识别.ELISPOT敏感性为90.0％,特异性96.7％.与ELISA检测抗EV71抗体方法 比较,ELISPOT优于ELISA.结论 该方法 有较高的特异性和灵敏度,有望成为诊断EV71感染的一种理想方法.

关键词：肠道病毒71型、VP1蛋白、外周血、酶联免疫斑点

所属期刊栏目：33

分类号：R446.6(诊断学)

在线出版日期：2023-08-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：115-119