Nox4在脓毒症小鼠内皮细胞铁死亡中的表达

摘要：

目的 通过盲肠结扎穿孔(cecal ligation and puncture,CLP)法建立小鼠脓毒症模型,验证脓毒症小鼠相关内皮细胞存在铁死亡及探讨Nox4在铁死亡中的作用.方法 用CLP复制C57BL/6小鼠的脓毒症模型.将小鼠随机分成3组:假手术(Sham)组、CLP组和CLP+铁死亡抑制剂ferrostatin-1(Fer-1)组,每组6 只.Fer-1组在CLP术前1 h经腹腔注射Fer-1(10 mg/kg),分别提取血管内皮细胞,检测CLP术后12 h各组小鼠脂质过氧化水平如丙二醛(malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)浓度;利用DCFH-DA测定细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,荧光探针技术测定细胞内Fe2+水平,利用ELISA检测血管内皮VEGF、ET-1、vWF表达情况;利用Western Blot检测各组细胞GPX4、Nox4的表达情况.结果 与Sham组相比,CLP组术后12 h脂质过氧化物蓄积,MDA明显升高,ROS和Fe2+大量蓄积,GSH明显下降;血管内皮受损,VEGF、ET-1、vWF表达明显升高;GPX4表达明显降低,Nox4表达显著升高,证明CLP可导致铁超载和铁死亡.给予Fer-1可明显降低CLP组小鼠内皮细胞内脂质过氧化物含量,减轻铁超载,缓解上述CLP小鼠的铁代谢障碍,降低细胞内ROS和Fe2+水平及VEGF、ET-1、vWF表达,恢复血管内皮细胞GPX4表达以及降低Nox4表达.证明抑制铁死亡后可减轻血管内皮受损程度.结论 脓毒症可引起血管内皮细胞铁死亡,导致血管屏障功能受损,Nox4作为NADPH氧化酶亚型的一种,在氧化应激及铁死亡中发挥促进作用,抑制铁死亡可降低Nox4表达,减轻血管内皮细胞损伤.

关键词：脓毒症、内皮细胞、铁死亡、Nox4

所属期刊栏目：32

分类号：R631(外科感染)

资助基金：苏州市科技局民生科技医疗卫生应用基础研究SYS2020162

在线出版日期：2023-06-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：501-505,603