盐酸法舒地尔对蛛网膜下腔出血大鼠早期脑损伤海马ROCK2蛋白及铁死亡的影响

摘要：

目的:探讨盐酸法舒地尔(fasudil hydrochloride，FH)对蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage，SAH)大鼠早期脑损伤海马区Rho激酶2(Rho-associated kinase 2，ROCK2)蛋白及铁死亡的影响。方法:36只SPF级Sprague-Dawley大鼠用随机数字表法分为3组：假手术组(Sham组)、蛛网膜下腔出血组(SAH组)、SAH+ROCK2蛋白抑制剂FH组(FH组)，每组12只。颈内动脉刺破法建立SAH大鼠模型，FH组大鼠于造模成功后30 min腹腔注射FH(15 mg/kg)，Sham组与SAH组注射等体积0.9%氯化钠溶液。干预后24 h，采用穿梭箱实验观察大鼠学习记忆能力，比色法检测大鼠海马区脑组织中Fe
2+含量，免疫组化及Western blot检测海马组织中ROCK2蛋白及铁死亡相关蛋白长链脂酰辅酶A合成酶4(long-chain acyl-CoA synthetase 4，ACSL4)、谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4，GPX4)的表达水平。采用SPSS 20.0软件进行统计分析，多组间比较采用单因素方差分析，进一步两两比较采用LSD检验。
结果:(1)穿梭箱实验中3组大鼠的躲避反应次数及躲避反应时间均差异有统计学意义(
F＝20.348，22.316，均
P<0.05)，SAH组大鼠躲避反应次数少于Sham组[(17.92±2.94)次，(27.13±3.48)次，
P<0.05]，躲避反应时间长于Sham组[(9.15±2.87)s，(3.68±1.09)s，
P<0.05]，而FH组反应次数[(21.63±4.11)次]多于SAH组，躲避反应时间[(6.08±1.76)s]短于SAH组(均
P<0.05)。(2)比色法检测结果显示，3组大鼠海马组织Fe
2+含量差异有统计学意义(
F＝7.965，
P<0.05)，SAH组Fe
2+含量高于Sham组[(0.091±0.032)nmol/mg，( 0.038±0.024)nmol/mg，
P<0.05]，FH组Fe
2+含量[(0.065±0.021)nmol/mg]低于SAH组(
P<0.05)。(3)免疫组化中3组大鼠海马组织ROCK2、ACSL4、GPX4阳性细胞数差异有统计学意义(
F＝7.602，14.171，36.077，均
P<0.05)，SAH组ROCK2及ACSL4阳性细胞[(21.63±4.72)个，(55.13±19.41)个]显著高于Sham组[(11.63±3.62)个，(23.38±3.74)个] (均
P<0.05)，FH组ROCK2及ACSL4阳性细胞数[(15.88±6.64)个，(44.75±8.29)个]均低于SAH组(均
P<0.05)，而SAH组GPX4阳性细胞数[(25.38±6.30)个]显著低于Sham组[(60.25±10.36)个](
P<0.05)，FH组GPX4阳性细胞数[(45.13±7.51)个]高于SAH组(
P<0.05)。(4) Western blot结果显示，3组大鼠海马组织ROCK2、ACSL4、GPX4蛋白表达水平均差异有统计学意义(
F＝4.812，12.573，10.849，均
P<0.05)，SAH组ROCK2及ACSL4蛋白表达水平均显著高于Sham组(均
P<0.05)，FH组ROCK2及ACSL4蛋白表达水平均低于SAH组(均
P<0.05)，而SAH组GPX4蛋白表达水平显著低于Sham组(
P<0.05)，FH组GPX4蛋白表达水平高于SAH组(
P<0.05)。
结论:FH可抑制海马区的铁死亡，改善大鼠学习记忆能力，其机制可能与下调ROCK2蛋白有关。

关键词：盐酸法舒地尔、Rho激酶2、蛛网膜下腔出血、铁死亡、大鼠

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资助基金：河南省医学科技攻关计划项目LHGJ20210744;Henan Province Medical Science and Technology Research ProjectLHGJ20210744

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：9-14