p16基因抑癌作用的体外实验

摘要：

将多种肿瘤抑制基因p16转入该基因缺失的人红白血病细胞株K562，观察外源p16表达及其对肿瘤细胞的生物学作用。首先应用FuGene6介导将真核细胞表达载体pBABE-puro-p16和对照空载体pBABE-puro分别转入K562细胞，加入嘌呤霉素(1.5 μg/μL)筛选14天，得到了抗性细胞集落K562-p16和K562-puro。再应用PCR，RT-PCR和免疫组化法，从DNA，RNA和蛋白质三个水平上检测了外源p16的成功转入和表达。细胞生长曲线显示K562-p16细胞生长受到明显抑制。流式细胞术结果显示K562-p16细胞的G1期细胞分布增加，凋亡细胞数增加。电泳实验显示K562-p16电泳率明显加快，渗透脆性曲线表明其具有更好的抗渗透破碎能力。以上结果表明外源p-16基因对肿瘤细胞株K562用一定的抑制作用，主要表现为G1→S期阻断和诱发肿瘤细胞凋亡，并使K562细胞表面电荷明显增加，渗透脆性下降。

关键词：p16基因、人红白血病细胞株、基因转移、生物流变学

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分类号：R318(医用一般科学)

资助基金：国家自然科学基金39830110

在线出版日期：2007-07-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：371-372