RNA干扰DGAT1和DGAT2在猪肝细胞和肌内前体脂肪细胞中表达的研究

摘要：

本研究旨在探索DGAT1和DGAT2基因表达对猪脂肪沉积效率的影响.以3日龄宗地花猪为实验动物,针对DGAT1和DGAT2基因mRNA序列设计6对shRNA序列,构建RNA干扰表达载体,将DGAT1和DGAT2的shRNA干扰载体分别转染至猪的肝细胞和肌内前体脂肪细胞中,采用RT-qPCR筛选出肝细胞和肌内前体脂肪细胞中的最佳shRNA干扰载体,将最佳干扰载体再次转染肝细胞和肌内前体脂肪细胞,测定细胞代谢液中甘油三酯和总胆固醇含量变化.结果表明:所构建的干扰载体对肝细胞中DGAT1和DGAT2基因的最高抑制效率分别为78.45％和87.52％,对肌内前体脂肪细胞中DGAT1和DGAT2基因的最高抑制效率分别为82.24％和89.82％;肝细胞和肌内前体脂肪细胞培养液中甘油三酯和总胆固醇的含量均降低,其中转染pGPU6/GFP/Neo-DGAT2-1实验组的肝细胞培养液中甘油三酯含量显著低于空白组(P＜0.05).结果提示,抑制DGAT1和DGAT2基因的表达,可降低猪肝细胞和肌内前体脂肪细胞代谢液中甘油三酯和总胆固醇的含量.

关键词：RNA干扰、DGAT1基因、DGAT2基因、猪肝细胞、猪肌内前体脂肪细胞

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分类号：S828.2(家畜)

资助基金：贵州关岭猪品系宗地花猪高繁殖力核心群建立[黔农育专字2016]009;贵州宗地花猪杂交配套体系研究及推广应用[黔科合NZ字2012]3013

在线出版日期：2018-08-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：91-96