鸡胚胎干细胞的分离和培养

摘要：

实验从鸡第X期胚胎中分离胚盘,以鸡成纤维细胞为饲养层,用添加了10%的胎牛血清、2%的鸡血清、2 mmol/L L-谷氨酰胺、1 m mol/L丙酮酸钠、5.5×10-5 mol/L β-巯基乙醇、10μL/mL非必需氨基酸以及含1 000 IU/mL白血病抑制因子(LIF)、10 ng/mL碱性成纤维生长因子(bFGF)和5 ng/mL干细胞生长因子(SCF)的高糖DMEM对细胞进行培养和传代,可以获得传至5～6代的鸡胚胎干细胞(ES).通过对传代培养后的鸡ES细胞进行AKP染色鉴定和SSEA-1的鉴定,证实细胞未发生分化,具有胚胎干细胞的特征.同时通过不同分离胚盘方法和不同消化时间的比较得出药勺法提取胚盘简单易行,原代消化5～8 min的ES细胞适合于传代培养.

关键词：胚胎干细胞、培养、传代、鉴定、鸡

所属期刊栏目：43

分类号：S831.1(家禽)

资助基金：教育部高等学校博士学科点专项科研基金20061117004

在线出版日期：2007-11-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：15-19