不同浓度药物PTC124和G418对HERG通道无义突变体的作用

摘要：

目的：通过对HERG基因无义突变体应用不同剂量PTC124和G418来观察其通道功能的恢复情况，并探讨药物的作用机制。
<br>　　方法：制备HERG基因R1014X突变体，将野生型（WT）HERG及R1014X分别瞬时转染至HEK293细胞，转染24 h后将其置入含不同浓度的PTC124和G418的培养液中孵育24 h。逆转录聚合酶链反应法检测各组细胞HERG信使核糖核酸（mRNA）的表达，蛋白印迹法检测野生型和R1014X给药前后通道蛋白的表达，全细胞膜片钳技术记录通道电流以评价HERG基因编码通道的功能性表达。
<br>　　结果：与野生型相比，R1014X突变体编码的通道蛋白的蛋白条带变短，蛋白量及mRNA水平无明显差异（P>0.05）。药物PTC124和G418均能恢复R1014X完整蛋白的表达，并呈剂量依赖性变化（P<0.05），PTC124的作用弱于G418（P<0.05）。药物干预后，R1014X突变体HERG通道的功能得到不同程度的恢复，其最大尾电流密度由（4.75±0.88） pA/pF分别增加至（9.62±0.73） pA/pF （PTC124，P<0.05）和（22.57±2.26） pA/pF （G418,P<0.05），G418作用使通道的半激活电压得到恢复（P<0.05），差异均有统计学意义。
<br>　　结论：药物PTC124和G418能不同程度恢复HERG基因无义突变的结构和功能性表达，其恢复HERG基因的蛋白表达呈剂量依赖性变化。

关键词：HERG、无义突变、PTC124、遗传性心律失常

分类号：R541(心脏、血管（循环系）疾病)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81070150

在线出版日期：2014-08-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：461-465