白藜三醇促进缺氧条件下人脐静脉内皮细胞的血管生成作用

摘要：

目的:探讨白藜三醇(Res)对氯化钴(CoCl2)诱导缺氧的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的血管生成作用的影响及可能机制.方法:体外培养HUVEC分5组:DMEM高糖(＜4500 mg/L)培养基培养细胞组(正常组)、CoCl2+DMEM高糖培养基(缺氧组)、缺氧+LY294002(阻断剂组)、缺氧+白藜三醇(药物组)、缺氧+白藜三醇+LY294002(药物阻断剂组).采用CCK-8法检测细胞增殖情况;采用蛋白免疫印迹(Western blot)法检测低氧诱导因子1 α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)的表达;免疫细胞化学的方法检测HIF-1α的蛋白表达;采用transwell chamber(迁移小室)检测内皮细胞的迁移能力;体外血管形成实验检测内皮细胞的体外血管形成能力.结果:①CCK-8:缺氧组及药物组(0.1、1、5、10 μmol/L)与正常组相比A490值升高(P均＜0.01);药物组(1、5μmol/L)与缺氧组比A490值升高(P均＜0.01).尤其药物组5μmol/L A490值明显升高(P＜0.01).②蛋白免疫印迹:缺氧组较正常组HIF-1 α、VEGF、p-Akt蛋白表达均增加(P均＜0.05);药物组(5 μmol/L)与缺氧组相比H1F-1α、VEGF、p-Akt蛋白表达均增加(P均＜0.01);药物阻断剂组(5μmol/L)较阻断剂组HIF-1 α、VEGF、p-Akt蛋白表达比较差异均无统计学意义(P均＞0.05).③免疫细胞化学:缺氧组胞内HIF-1 α阳性表达,显色呈黄褐色;药物组(5μmol/L)胞内HIF-1 α强阳性表达,显色呈深黄褐色.④transwell chamber:药物组(5 μmol/L)内皮细胞迁移率大于缺氧组(P＜0.01).⑤体外血管形成实验:药物组(5 μmol/L)在体外的血管形成数量明显大于缺氧组(P＜0.01).结论:白藜三醇可能是激活磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI-3K)/Akt通路促进HIF-1 α聚集,从而促进血管的新生.

关键词：白藜三醇、低氧诱导因子、血管内皮生长因子、蛋白激酶B、血管生成

所属期刊栏目：28

分类号：R541(心脏、血管（循环系）疾病)

资助基金：江苏省卫生厅医学重点人才基金RC2007089

在线出版日期：2014-03-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：622-626