脂肪间充质干细胞-壳聚糖凝胶复合物治疗大鼠深Ⅱ度烫伤创面实验研究
目的 制备脂肪间充质干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)与温敏氯化壳聚糖(chitosan chloride,CSCl)凝胶复合物,研究其生物相容性及对大鼠深Ⅱ度烫伤创面修复的可行性.方法 取SPF级6周龄雄性SD大鼠皮下脂肪组织,采用酶原消化并差速贴壁法制备ADSCs.将CSC1、β-甘油磷酸钠和羟乙基纤维素按8∶2∶2.5比例混合,制作温敏CSCl凝胶;采用Live/Dead染色和细胞计数试剂盒8(cell counting kit 8,CCK-8)法观察ADSCs在其中的存活和增殖情况.取SPF级8周龄雄性SD大鼠72只,采用开水接触烫伤法制备深Ⅱ度烫伤创面模型,随机分为3组,每组24只,A组为空白对照组,B组用温敏CSC1凝胶涂抹创面,C组用ADSCs/温敏CSCl凝胶复合物涂抹创面.术后3、7、14、21 d观察创面闭合情况并计算创面闭合率;术后7d行HE染色观察炎性细胞数,21 d行HE染色观察新生表皮厚度;同时于术后7d行CD31免疫组织化学染色观察新生微血管情况.结果 CSC1有温度敏感性,4℃为液态,37℃时成凝胶.Live/Dead染色和CCK-8法结果 显示ADSCs在温敏CSCl凝胶中存活并持续增殖.大体观察示,术后各时间点C组创面闭合率均高于A、B组(P＜0.05).HE染色示,术后7d,3组大鼠创面修复进入纤维增生期,各组可见胶原沉积,真皮层可见炎性细胞浸润,C组炎性细胞数显著小于A、B组,B组小于A组(P＜0.01).术后21d,B、C组新生上皮及真皮层纤维结缔组织排列整齐,可见成纤维细胞及新生毛细血管;A组亦可见新生表皮覆盖,但真皮层纤维结缔组织排列较紊乱,见零星毛细血管.C组新生表皮厚度显著大于A、B组,B组大于A组(P＜0.01).术后7d,CD31免疫组织化学染色示各组均可见新生微血管,C组大鼠创面新生微血管数显著高于A、B组,B组高于A组(P＜0.05).结论 ADSCs/温敏CSC1凝胶复合物具有良好的组织相容性,并且能加快大鼠深Ⅱ度烫伤创面修复.
氯化壳聚糖、凝胶、脂肪间充质干细胞、深Ⅱ度烫伤、创面修复、大鼠
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四川省医学会项目s16082
2019-02-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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