载VEGF165多孔聚己内酯支架促进脂肪来源干细胞体内外成骨分化的实验研究
目的 探讨载VEGF165多孔聚己内酯[poly (ε-caprolactone),PCL]支架对脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)成骨分化的影响.方法 采用溶剂置换法、粒子浸出法及热致相分离法制备载VEGF165多孔PCL支架(记作Sf-g/VEGF),扫描电镜观察其形貌、测定药物释放率.取15只SD大鼠腹股沟脂肪,分离培养ADSCs并传代.取第3～4代细胞复合至Sf-g/VEGF,体外培养7d后行茜素红染色、茜素红活性测试及实时荧光定量PCR检测体外成骨效果;以明胶修饰的多孔PCL支架(记作Sf-g)与ADSCs复合培养作为对照.取SPF级SD大鼠6只,于颅骨左、右侧各制备一直径为5 mm缺损,将其随机分为3组(n=4);阴性对照组不作任何处理,Sf-g组植入细胞-Sf-g支架复合体,Sf-g/VEGF组植入细胞-Sf-g/VEGF支架复合体.8周后取出含细胞-支架复合体的颅骨分别行Micro-CT扫描及HE染色,评估体内成骨效果.结果 扫描电镜示Sf-g/VEGF支架呈多孔结构,VEGF释放曲线呈二阶段释放,120 h累积释放率为80％;提示成功制备Sf-g/VEGF.体外培养7d后茜素红染色检查示Sf-g/VEGF组茜素红活性显著高于Sf-g组(t=10.761,P=0.000).实时荧光定量PCR检测,Sf-g/VEGF组成骨特异性指标特异AT序列结合蛋白2(special AT-rich sequence protein 2,Satb2)、ALP、骨钙素(osteocalcin,OCN)和骨桥蛋白(osteopontin,OPN) mRNA相对表达量均较Sf-g组升高(P＜0.05).体内植入后8周Micro-CT扫描及组织学观察显示,Sf-g组及Sf-g/VEGF组均可见骨缺损部分修复,且Sf-g/VEGF组更显著;Sf-g/VEGF组新生骨组织体积及面积均显著优于Sf-g组(P＜0.05).结论 载VEGF165多孔PCL支架可显著提高ADSCs的体内、外成骨分化效果.
骨组织工程、VEGF、脂肪干细胞、聚己内酯、支架、成骨分化、大鼠
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National Natural Science Foundation of China ;Natural Science Foundation of Jiangsu Province ;江苏省自然科学基金资助项目
2021-07-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
270-275
