BMSCs条件培养液诱导小胶质细胞分泌精氨酸酶1的初步研究

摘要：

目的 初步探讨BMSCs条件培养液对小胶质细胞(microglia,MGs)激活及其分泌精氨酸酶1 (arginase 1,Arg1)的影响.方法 取4周龄SD大鼠股骨和胫骨骨髓,采用差速贴壁法分离培养原代BMSCs,行Vimentin免疫荧光染色鉴定.取新生3日内SD大鼠全脑,采用胰蛋白酶消化法分离培养原代MGs,行Iba1免疫荧光染色鉴定.收集对数生长期BMSCs培养液制备BMSCs条件培养液,取原代MGs,分别使用含BMSCs条件培养液的DMEM/F12培养基(实验组)和普通DMEM/F12培养基(对照组)培养.培养48 h后采用倒置相差显微镜观察MGs的形态改变;Iba1免疫荧光染色观察MGs激活状态;Iba1和Arg1免疫荧光双标染色及Western blot检测MGs中Arg1的表达.结果 倒置相差显微镜观察示BMSCs约14d进入对数生长期,Vimentin免疫荧光染色结果示98％以上细胞呈阳性反应;MGs约21d进入对数生长期,Iba1免疫荧光染色结果示约80％细胞呈阳性反应.倒置相差显微镜观察示实验组MGs被激活,激活后的MGs胞体增大、突起变短、呈阿米巴样变化.免疫荧光染色示实验组Iba1阳性细胞显著多于对照组,比较差异有统计学意义(t=0.007,P=0.000);免疫荧光双标染色示实验组Iba1和Arg1双阳性细胞显著多于对照组,比较差异有统计学意义(t=0.007,P=0.000);Western blot示实验组Arg1蛋白相对表达量显著高于对照组,比较差异有统计学意义(t=0.001,P=0.000).结论 BMSCs条件培养液可激活MGs,并促进MGs表达Arg1.

关键词：BMSCs、小胶质细胞、精氨酸酶1、大鼠

所属期刊栏目：31

分类号：R737.33;R3;R542.2

在线出版日期：2018-01-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1500-1505