金黄色葡萄球菌肽聚糖促进破骨细胞分化的分子机制研究
目的 探讨金黄色葡萄球菌肽聚糖(Staphylococcal peptidoglycan,PGN-sa)促进破骨细胞分化的分子机制.方法 Western blot检测:取Raw264.7细胞,以PGN-sa或SC75741 (NF-κB激活的强效抑制剂)+PGN-sa分别作用0、1、2、3d,检测活化T细胞核因子1(nuclear factor of activated T-cells cytoplasmic 1,NFATc1)蛋白表达;分别作用0、5、10、20、40、60 min,检测破骨细胞分化信号通路相关蛋白[细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)、p38、c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)、NF-κB、NF-κB抑制蛋白(inhibitor of NF-κB,IκB-α)、Akt及磷酸化蛋白p-p38、p-ERK、p-JNK、p-Akt、p-NF-κB]表达.ELISA检测:取Raw264.7细胞分为4组,分别以100(A组)、200(B组)、400 ng/mL PGN-sa(C组)及PBS(D组)作用1、2、3d,检测TNF-α、IL-1α及IL-6的蛋白表达量.结果 Western blot检测:随培养时间延长,NFATc1蛋白表达量呈逐渐增加趋势,各时间点间比较差异均有统计学意义(P＜0.05);但加入SC75741后,NFATc1蛋白表达在2、3d明显受到抑制,与未加入SC75741前比较差异有统计学意义(P＜0.001).PGN-sa刺激后5、10 min时IκB-α蛋白表达量明显降低,p-NF-κB蛋白表达量明显增高,均于20 min后恢复正常,5、10 min时蛋白表达量与其余时间点比较差异均有统计学意义(P＜0.001),且5min时p-NF-κB蛋白表达量高于10 min时(P＜0.001).加入SC75741后,IκB-α及p-NF-κB的蛋白表达量无变化,各时间点间比较差异均无统计学意义(P＞0.05).其他蛋白(ERK、p38、JNK、NF-κB、Akt及p-p38、p-ERK、p-JNK、p-Akt)表达量在各时间点均无明显变化(P＞0.05).ELISA检测:各时间点A～D组TNF-α及IL-1α均未见表达.各组IL-6的表达随时间延长呈递增趋势,各时间点间比较差异均有统计学意义(P＜0.05).培养1d时,各组间比较IL-6蛋白表达差异无统计学意义(P＞0.05);2、3d时,A、B、C组IL-6蛋白表达显著高于D组,A、B、C组间呈递增趋势,各组间比较差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 PGN-sa通过NF-κB信号通路促进破骨细胞的分化形成,IL-6在这一过程中可能起一定作用.
金黄色葡萄球菌肽聚糖、破骨细胞分化、NF-κB、骨髓炎、分子机制
30
R743.34;R363;R681
2016-11-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
1244-1248
