利用温敏胶原动态培养构建组织工程复合物的初步研究
目的 研究动态培养条件下以BMSCs为种子细胞、温敏胶原(thermosensitive collagen hydrogel,TCH)为细胞黏附基质和聚乳酸(poly-L-lactic acid,PLLA)为支架材料体外构建的细胞-支架复合物形态及功能特征.方法 分离Fischer344大鼠长骨来源的BMSCs,并体外扩增至第3代作为种子细胞,利用PLLA纤维编织材料作为支架,结合TCH为细胞黏附基质构建细胞-支架复合物.实验组和对照组细胞-支架复合物分别行动态培养和静态培养.体外培养7d对两组复合物行大体观察和扫描电镜观察,检测培养0、1、3、7d后复合物中总DNA含量.结果 两种方式培养后胶原均包绕PLLA支架材料并形成致密的膜状结构.扫描电镜观察示,实验组复合物表面BMSCs呈梭形沿长轴排列整齐,细胞活性良好,表面可见绒毛凸起,纵断面见PLLA纤维之间充满胶原纤维和细胞;对照组复合物表面BMSCs呈延展状态,PLLA之间的细胞相对较少.体外培养1、3、7d实验组细胞-支架复合物中总DNA含量均明显高于对照组(P<0.05).与培养0d比较,两组培养1、3、7d的总DNA含量均逐渐升高,但仅7d时总DNA含量与培养0d比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 利用TCH和PLLA纤维联合构建的复合细胞外基质具有良好的生物相容性,动态培养可促进BMSCs在材料表面和内部的分布,促进细胞增殖,可用于组织工程复合物的体外构建.
动态培养、组织工程、细胞外基质、种子细胞、支架材料
30
R318.08;R687.3;R711.2
2016-04-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
309-313