腺病毒介导TGF-β1基因转染腘绳肌腱对兔前交叉韧带重建术后腱-骨愈合的组织形态学影响
目的 探讨腺病毒介导TGF-β1基因转染腘绳肌腱对兔前交叉韧带(anterior cruciate ligament,ACL)重建术后腱-骨愈合组织形态学的影响.方法 取重组腺病毒载体AdTGF-β1与腺病毒空载体AdGFP,以DMEM培养液稀释其滴度至5×108 PFU/mL.取新西兰大白兔48只,体质量1.6 ～ 2.5 kg,随机分为A、B、C3组(n=16),以兔右后肢膝关节制备自体同侧腘绳肌腱重建ACL模型;ACL重建前A、B组腘绳肌腱分别以AdTGF-β1与AdGFP转染培养12 h,C组以DMEM培养作为对照.转染后12h,荧光显微镜观察A、B组腘绳肌腱绿色荧光表达,ELISA检测A组腘绳肌腱中TGF-β1蛋白含量.重建术后观察各组动物一般情况,并于2、4、8、12周取材行HE及Masson染色,计数腱-骨界面成纤维细胞以及参照Buark评价分级标准对腱-骨愈合进行评价.结果 A、B组腘绳肌腱转染培养后,均可见绿色荧光表达;A组转染12 h时腘绳肌腱组织中TGF-β1蛋白表达量为(221.0± 12.2) ng/mL.组织学观察示:A组术后腱-骨界面见成纤维细胞生成及胶原纤维逐渐增多,Sharpey纤维逐步形成;至12周时界面区见到规整Sharpey纤维,部分区域组织有直接愈合倾向.而B、C组移植肌腱与骨隧道间成纤维细胞较A组少且腱-骨连接疏松;至12周时界面区组织未见直接愈合倾向.各时间点A组腱-骨界面成纤维细胞计数以及腱-骨愈合分级均显著优于B、C组,比较差异有统计学意义(P＜0.05);B、C组间比较差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 腺病毒介导TGF-β1基因转染方法可促进自体腘绳肌腱重建兔ACL术后腱-骨愈合.
腺病毒、TGF-β1、前交叉韧带、腱-骨愈合、兔
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2013年湖南省教育厅资助项目13c836Supported by Education Department Command of Hunan Province 13c836
2016-01-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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