Triton X-100对脂质体介导的BMP-2基因转染大鼠BMSCs的作用
目的 探讨Triton X-100对脂质体介导的BMP-2基因转染大鼠BMSCs的作用.方法 8周龄Wistar大鼠1只,雄性,体质量120 g.取Wistar大鼠股骨、胫骨骨髓,采用贴壁培养法分离培养BMSCs并鉴定.取第3代BMSCs,采用MTT法筛选Triton X-100适宜浓度.实验分成3组,实验组:BMP-2+脂质体+0.010％Triton X-100+ BMSCs,常规转染组:BMP-2+脂质体+BMSCs,空白对照组:BMSCs+血清培养基.转染后48 h,倒置荧光显微镜观察各组绿色荧光蛋白表达情况;转染后72 h,采用实时荧光定量PCR检测BMP-2 mRNA表达.结果 0.010％Triton X-100既能使BMSCs保持一定的活力,又可达到一定的作用效果,故确定其为适宜浓度.转染后48 h,倒置荧光显微镜下见实验组和常规转染组均有绿色荧光蛋白表达,空白对照组无绿色荧光蛋白表达.转染后72h,实验组BMP-2 mRNA相对表达量为5.94±0.12,常规转染组为4.99±0.08,差异有统计学意义(t=360.28,P=0.02).实验组转染效率较常规转染组平均提高了19％.结论 0.010％Triton X-1 00可以促进脂质体介导的BMP-2基因转染大鼠BMSCs,并提高其转染效率.
BMSCs、Triton X-100、脂质体、基因治疗
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Basic Research for Application of Department of Science and Technology of Sichuan Province 2008jy0014;四川省科技厅应用基础研究资助项目2008jy0014
2015-03-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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