不同脱细胞方案制备主动脉细胞外基质支架的比较研究
目的 应用不同方法对猪升主动脉进行脱细胞,从脱细胞有效性、细胞外基质破坏、生物力学和组织相容性等方面进行综合比较,以期获得适宜的组织工程血管支架.方法 取市售猪升主动脉30根随机分成6组(n=5),分别行以下脱细胞处理:A组0.1%胰蛋白酶/0.02%EDTA/PBS,B组1%Triton X-100/0.02%EDTA/蒸馏水,C组1%脱氧胆酸钠/蒸馏水,D组0.5%脱氧胆酸钠/0.5%SDS/蒸馏水,E组1%脱氧胆酸/蒸馏水;F组未行脱细胞处理,作为对照.观察各组支架大体结构,行HE染色观察支架显微结构和脱细胞有效性,DNA定量分析评价脱细胞效率;免疫组织化学染色观察Ⅰ型胶原和弹性蛋白损伤;扫描电镜观察内膜表面结构,测定生物力学性能.取90只SD大鼠随机分为6组(n=15),于腹壁肌内分别植入各组支架,术后7、14、28 d行HE染色评价支架免疫原性和组织相容性.结果 HE染色及DNA定量分析示,仅A、D组支架完全去除细胞成分.A组Ⅰ型胶原表达量显著低于其余各组(P<0.05),基底膜破坏严重,生物力学性能下降,最大应力和抗张强度显著低于其余各组(P<0.05),断裂伸长率显著高于其余各组(P<0.05).D组Ⅰ型胶原破坏较B、C、E、F组严重(P<0.05),但基底膜完整,生物力学性能接近于F组(P>0.05).植入大鼠体内实验显示,D组支架免疫原性和组织相容性明显优于其余各组,炎性细胞浸润程度轻(P<0.05).结论 采用0.5%脱氧胆酸钠/0.5%SDS/蒸馏水对猪主动脉进行脱细胞,获得的细胞外基质支架具有用于构建组织工程血管的潜能.
血管组织工程、支架材料、细胞外基质、脱细胞、猪、大鼠
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R318.08;R737.33;R622.4
2014-12-17(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
1413-1421