损伤胰腺组织提取液诱导大鼠BMSCs分化为胰岛素分泌细胞的研究
目的 探讨大鼠损伤胰腺组织提取液对诱导大鼠BMSCs分化为胰岛素分泌细胞(insulin producing cells,IPCs)的效果和机制. 方法 取6周龄SD大鼠80只,将其中40只大鼠胰腺切除60％,48 h后取残存胰腺组织制备损伤胰腺组织提取液;余40只大鼠用于制备正常胰腺组织提取液.取4周龄SD大鼠的胫骨及股骨分离培养BMSCs,取第3代细胞分为实验组、正常对照组和空白对照组,分别加入损伤胰腺组织提取液、正常胰腺组织提取液和普通细胞培养液诱导培养.培养14 d过程中,观测细胞形态学改变以及胰腺发育相关基因和蛋白的表达;14d时,流式细胞仪检测分化细胞C肽表达阳性率,葡萄糖刺激实验评价分化细胞释放胰岛素的水平. 结果 损伤胰腺组织提取液可诱导大鼠BMSCs分化为IPCs,在分化过程中表达与胰腺发育相关的基因:胰岛素促进因子1(pancreatic duodenal homeobox 1,PDX-1)、胰岛因子1、葡萄糖转运蛋白2、前蛋白转化酶2、神经元素3、Nkx6.1、生长抑素;细胞免疫荧光染色示其表达成熟胰腺β细胞标志性蛋白PDX-1、胰岛素、C肽、Nkx6.1.而正常对照组和空白对照组未能检测到相关基因和蛋白的表达.实验组C肽表达阳性率为13.8％±1.8％,显著高于正常对照组和空白对照组的1.6％±0.4％(P＜0.05).实验组在高、低糖刺激下胰岛素释放水平明显高于正常对照组和空白对照组(P＜0.05),但仅为天然胰岛的1/40和1/47(P＜0.05). 结论 胰腺损伤后,损伤胰腺组织将分泌与胰腺修复和发育分化相关的转录蛋白,这些蛋白可诱导大鼠BMSCs向IPCs分化.
胰腺组织工程、BMSCs、胰岛素分泌细胞、损伤胰腺组织提取液、诱导分化、大鼠
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R711.31;S821.2;R329.24
2014-06-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
625-632
