钛颗粒对成骨细胞增殖分化及细胞形态的影响
目的 通过观察钛颗粒对成骨细胞增殖分化和细胞形态的影响,探讨其可能的内在联系和作用机制.方法 取10只新生24 h SD大鼠颅骨,采用多次酶消化法体外分离培养成骨细胞,ALP和茜素红染色进行细胞鉴定.取生长良好的第3代细胞,分别采用浓度为0.01、0.05、0.1、0.5、1 mg/mL的钛颗粒培养基(0.01、0.05、0.1、0.5、1 mg/mL组)培养,7d后用细胞计数试剂盒8检测吸光度(A)值,比较不同浓度钛颗粒对成骨细胞增殖能力的影响,并筛选半数致死浓度;ELISA法检测细胞Ⅰ型胶原表达,比较不同浓度钛颗粒对成骨细胞分化能力的影响.另取以半数致死浓度钛颗粒培养7d的成骨细胞(实验组)进行FITC-鬼笔环肽和碘化丙啶双重荧光染色,激光共聚焦显微镜下观察吞噬钛颗粒后细胞形态学的改变.以上观察指标均以正常第3代成骨细胞作为对照组. 结果 ALP及茜素红染色鉴定提示培养的细胞为成骨细胞.培养7d,各浓度组成骨细胞增殖、分化能力与对照组比较均有不同程度下降,差异均有统计学意义(P＜0.05).同时随浓度增加,各浓度组对成骨细胞增殖的抑制作用逐渐增强,成骨细胞Ⅰ型胶原表达逐渐降低;除0.01、0.05 mg/mL组间差异无统计学意义(P＞0.05)外,其余各浓度组间比较差异均有统计学意义(P＜0.05).钛颗粒的半数致死浓度为0.5 mg/mL.激光共聚焦显微镜下示,与对照组比较,实验组吞噬了钛颗粒的成骨细胞皱缩变形,伪足收缩变短,微丝排列紊乱. 结论 钛颗粒可抑制成骨细胞的增殖和分化能力,这种作用可能与吞噬钛颗粒后细胞形态学的改变有关.
钛颗粒、成骨细胞、细胞增殖、细胞分化、细胞形态、大鼠
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2014-06-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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