严重烧伤患者血清对人脐带MSCs生物学特性的影响
目的 通过观察严重烧伤患者血清对体外培养的人脐带MSCs (human umbilical cord MSCs,hUCMSCs)生物学行为的影响,探讨hUCMSCs移植治疗严重烧伤的可行性. 方法 取足月剖腹产手术的健康胎儿脐带组织分离培养hUCMSCs,将第3代hUCMSCs用于实验.根据培养血清不同将实验分为3组,分别为10％FBS组(A组)、10％正常血清组(B组)和10％烧伤血清组(C组).于培养24 h、72 h和6d,采用倒置显微镜观察各组细胞形态及融合情况,MTT法测定细胞增殖;培养后第6天采用碘化丙啶染色、流式细胞仪检测细胞周期,吖啶橙/溴化乙锭染色法检测细胞凋亡,β-半乳糖苷酶(β-galactosidase,β-gal)染色检测细胞衰老,ELISA法测定B、C组血清中TNF-α、IL-1、PDGF及IGF-1含量. 结果 各时间点各组细胞形态均呈长梭形,部分呈多角形;但C组细胞融合速度显著快于A、B组.细胞增殖曲线显示,培养2～6 d,C组增殖细胞数高于A、B组,差异有统计学意义(P＜0.05).流式细胞仪检测示,培养6dA、B、C组hUCMSCs增殖期(S期)比例分别为9.21％±1.02％、11.79％±1.87％和20.54％±2.03％,C组显著高于A、B组(P＜0.05).各时间点各组细胞形态和结构正常,未见细胞核着橘红色荧光的凋亡细胞或死亡细胞.培养6dA、B、C组 β-gal染色阳性细胞百分率分别为4.8％±0.2％、3.8％±0.4％和2.6％±0.1％,C组显著低于A、B组(P＜0.05).ELISA法检测C组血清中TNF-α、IL-1、PDGF及IGF-1含量显著高于B组,差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 严重烧伤患者血清中含有较高水平的TNF-α、IL-1、PDGF和IGF-Ⅰ等细胞因子,可显著刺激hUCMSCs快速增殖,不引起细胞凋亡,能减少细胞衰老,将hUCMSCs移植治疗严重烧伤可行.
人脐带MSCs、烧伤患者血清、细胞增殖、细胞衰老、细胞治疗
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国家科技支撑计划资助项目2009BAI87B03;解放军总医院第一附属医院院管课题资助项目QN201207;National Science and Technology Support Program2009BAI87B03;Hospital Management Subject of the First Hospital Affiliated to General Hospital of Chinese PLAQN201207
2013-10-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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