白芷活性提取物对人角质形成细胞生物学特性的影响
目的 体外观察白芷活性提取物对人皮肤角质形成细胞(keratinocytes,KC)生物学特性的影响,初步探讨其促进创面愈合的可能机制. 方法 取人皮肤KC的HaCaT细胞株,复苏培养取第5代细胞进行实验.取白芷生药95％乙醇提取后,将其活性提取物溶解于含0.25％ FBS的DMEM培养液中,稀释至5×10-2、5×10-3、5×10-4、5×10-5 g/L,分别与KC培养5d后采用MTT法测定细胞增殖活性,以含0.25％ FBS的DMEM培养作为对照.根据细胞增殖活性确定最佳浓度后,取KC分别采用最佳浓度白芷活性提取液(实验组)及含0.25％ FBS的DMEM(对照组)培养.培养48 h后流式细胞仪测定细胞周期,实时荧光定量PCR检测细胞周期相关基因细胞周期素D1 (cyclin D1)、凋亡相关基因天冬氨酸半胱氨酸酶3 (Caspase-3) mRNA的表达. 结果 培养5d后,MTT测定5×10-4、5x10-3、5x 10-2 g/L浓度可促进KC增殖,吸光度(A)值与对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);其中5x 10-3 g/L浓度组A值最高,确定为最佳浓度.实验组S期及G2/M期细胞数量较对照组明显增多,G0/G1期细胞数量明显减少,差异均有统计学意义(P＜0.05).实验组cyclin D1及Caspase-3 mRNA相对表达量均低于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 白芷活性提取物能促进KC增殖,同时下调cyclin D1的表达加快细胞周期进程,下调Caspase-3的表达抑制细胞凋亡,以加快上皮化进程促进创面愈合.
白芷、角质形成细胞、创面愈合、细胞生物学特性
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R285.5(中药学)
2012-06-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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