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复合血管生成素1基因及富血小板血浆的组织工程骨修复桡骨骨缺损

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目的 探讨以β磷酸三钙(β tricalcium phosphate,β-TCP)为支架,复合富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)和转染血管生成素1(angiopoietin I,Ang-1)基因的组织工程骨修复节段性骨缺损的能力. 方法 取兔股骨骨髓分离培养BMSCs,将Ang-1基因通过慢病毒转染至第2代BMSCs,转染后48 h接种于β-TCP上培养,然后复合0.5 mL PRP,制备复合PRP的组织工程骨.取20只3月龄新西兰大白兔制备双侧桡骨15mm骨缺损模型,采用自身对照,分别于每只动物左侧和右侧骨缺损处植入未转染Ang-1基因的组织工程骨(对照组)及转染Ang-1基因的组织工程骨(实验组).术后行大体观察,于2、4、8、12周行X线片观察,取材行HE染色、免疫组织化学染色及生物力学检测. 结果 细胞转染48 h后转染效率>90%,通过RT-PCR检测到转染细胞内Ang-1基因表达显著增高.术后所有动物患肢活动良好.X线片观察示实验组术后4周骨缺损处已有骨痂形成,8周有部分骨性愈合,12周骨缺损处完全骨性愈合;对照组至术后12周时无骨性愈合.HE染色示实验组术后8周有毛细血管出现,12周大量毛细血管生长于新生骨中;对照组8周未见新生毛细血管,12周见少量毛细血管.术后8、12周实验组微血管密度分别为(50.1±7.8)个/mm2和(66.1±3.5)个/mm2,对照组分别为0和(30.3±7.2)个/mm2;术后12周两组间比较差异有统计学意义(Z=2.107,P=0.031).免疫组织化学染色观察示术后8周实验组仍有Ang-1分泌.生物力学测试结果显示术后12周实验组三点弯曲试验和压缩试验的最大负荷均显著高于对照组(P< 0.05). 结论 复合PRP和转染Ang-I基因的组织工程骨修复兔桡骨节段性骨缺损后,组织工程骨内可形成新生血管,促进骨愈合.

组织工程骨、血管生成素1、基因转染、桡骨缺损、修复、兔

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R318.08(医用一般科学)

上海市科学技术委员会启明星项目09QA1404500

2011-11-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

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