人肝细胞生长因子修饰的BMSCs对大鼠同种异体肝移植免疫排斥的影响
目的 观察肝细胞生长因子(hepatocyte growthfactor,HGF)修饰的BMSCs对大鼠同种异体肝移植后免疫排斥反应的影响,探讨其诱导免疫耐受的机制.方法 3～4周龄清洁级雄性SD大鼠8只,体重75～85 g,用于分离培养BMSCs;成年清洁级雄性SD大鼠64只,体重200～250 g,作为供体;成年清洁级雄性Wistar大鼠64只,体重230～280 g,作为受体.建立稳定的同种异体肝移植动物模型并随机分为4组(n=16),A、B、C、D组分别立即经门静脉注入1 mL生理盐水、1 mL细胞密度为2×106个/mL的BMSCs、1 mL细胞密度为2 × 106个/mL的BMSCs/绿色荧光蛋白、1 mL细胞密度为2×106个/mL的BMSCs/hHGF.术后作实验动物生存曲线分析;术后7 d检测实验动物肝功能,并取肝脏组织行病理组织学观察,RT-PCR检测肝组织内hHGF mRNA表达,ELISA法检测血清中hHGF、IL-2、IL-4、IL-10、IFN-Υ细胞因子的表达,TUNEL法检测肝组织内细胞凋亡情况,免疫组织化学方法检测增殖细胞核抗原(oroliferating cell nuclear antigen,PCNA)在肝组织内的表达.结果 D组生存时间显著高于A、B、C组(P＜0.01);B、C组生存时间明显高于A组(P＜0.01),但B、C组间生存时间差异无统计学意义(P＞0.05).RT-PCR示检测D组肝组织内有hH-GF mRNA表达,ELISA检测血清中hHGF水平达(6.2±1.0)ng/mL.相比B、C组,D组疗效更显著,肝功能明显改善,病理学无急性排斥反应或仅为轻度;IL-2、IFN-γ水平降低,IL-4、IL-10水平升高,细胞凋亡明显减少,PCNA表达显著升高,除IL-4水平比较差异无统计学意义(P＞0.05)外,其余指标比较差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 通过门静脉输注BMSCs/hHGF至大鼠同种异体肝移植模型能成功诱导免疫耐受.与单纯应用BMSCs相比,BMSCs/hHGF在移植肝局部形成高浓度hHGF免疫抑制微环境,能更显著抑制急性排斥反应,延长移植受体存活时间.BMSCs/hHGF的免疫抑制作用与诱导Th1细胞向Th2细胞偏移、减少肝细胞凋亡、促进肝细胞增殖有关.
BMSCs、肝细胞生长因子、急性排斥反应、同种异体肝移植、免疫抑制、大鼠
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R394.8
福建省教育厅科研项目JA09110
2011-12-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
871-876
