聚乙烯醇/柞蚕丝素蛋白材料作为肌腱组织工程支架材料的初步研究
目的 检测聚乙烯醇(polyvinyl alcohol,PVA)/柞蚕幺幺素蛋白(wild antheraea pernyi silk fibroin,WSF)电纺膜与肌腱细胞的细胞相容性,探讨其作为肌腱组织工程支架材料的可行性. 方法 以质量分数为98%的甲酸为溶剂,配制浓度均为11%的WSF溶液、PVA溶液及PVA/WSF(质量配比为9:1)溶液,采用电纺丝技术制备WSF、PVA及PVA/WSF电纺膜,扫描电镜观察电纺成丝情况.取5只3日龄SD大鼠尾腱,体外分离培养肌腱细胞并传至第3代进行实验.取浓度为1×106个/mL肌腱细胞分别与PVA及PVA/WSF电纺膜复合培养,4、12 h采用MTT法测量细胞黏附率.取浓度为4.5 ×103个/mL肌腱细胞,分别于PVA、1/2 PVA、1/4 PVA、PVA/WSF、1/2 PVA/WSF、1/4 PVA/WSF电纺膜浸提液中培养,MTT法测定培养1、3、5、7d的吸光度(A)值,并进行毒性等级评价.取PVA、PVA/WSF电纺膜分别与细胞密度为1×106个/mL的肌腱细胞悬液100 IxL复合培养制备细胞.材料复合物,7 d后行HE染色观察,1、3、5、7 d行扫描电镜观察. 结果 WSF甲酸溶液无法电纺成丝,PVA和PVA/WSF甲醛溶液均可成功电纺成丝.肌腱细胞与PVA、PVA/WSF电纺膜复合培养4 h后,其细胞黏附率分别为26.9%±0.4%、87.0%4±1.0%,差异有统计学意义(t=100.400,P=0.000);复合培养12h后,其细胞黏附率分别为35.2%4±0.6%、110.0%±1.7%,差异有统计学意义(t=42.500,P=0.000).体外浸提液毒性评价结果显示,培养后1、3、5、7 d各种电纺膜间细胞A值比较,差异均有统计学意义(P<0.05);1/2 PVA和1/4 PVA浸提液细胞毒性等级差异有统计学意义(P<0.05).细胞-材料复合物的组织学及扫描电镜观察显示肌腱细胞均可黏附于PVA、PVA/WSF电纺膜表面,但PVA/WSF电纺膜上细胞较多. 结论 PVA/WSF电纺膜支架材料具有良好的细胞相容性,有望成为肌腱组织工程的理想支架.
肌腱组织工程、聚乙烯醇、柞蚕丝素蛋白、电纺丝技术、支架材料、肌腱细胞、大鼠
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R3(基础医学)
国家自然科学基金;福建省科技厅重点项目
2011-04-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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