不同部位取材的雪旺细胞培养与纯化研究

摘要：

目的 探讨不同部位取材分离纯化雪旺细胞(Schwann cells,SCs)的纯度、活性以及数量差异,为神经缺损修复提供优质、足量种子细胞奠定理论基础. 方法 6只5日龄SD大鼠,雌雄不限,体重8～10 g;切取背根神经节(实验组)和坐骨神经(对照组).采用联合酶消化加机械吹打法分离培养SCs,并进行纯化及传代培养.取第1代SCs,用计数法绘制8 d内SCs生长曲线,MTT法检测8 d内SCs增殖情况,抗S-100免疫细胞化学检测SCs纯度,ELISA法检测脑源性神经营养冈子(brain-derived ncurotrophic factor,BDNF)浓度. 结果 每只大鼠可切取背根神经节36～43个.消化成单个细胞后计数,实验组可获取(7.5±0.6)×106个SCs,对照组可获取(3.5 4±0.4)×106个SCs,差异有统计学意义(t=13.175,P=0.000).两组SCs第3天开始进入对数增长期,随培养时间延长,细胞数及细胞增殖吸光度(A)值均呈上升趋势:且培养3、4、5、6 d时,实验组细胞数及A值明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).经S-100免疫细胞化学检测,实验组SCs纯度为92.08%4±3.45%,对照组为77.50%4±3.57%,差异有统计学意义(t=6.869,P=0.001).ELISA法检测示实验组培养3 d和5 d时BDNF浓度均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05). 结论 与坐骨神经相比,取材于背根神经节能获得数量更多、纯度和活性更高的SCs,为神经损伤修复创造了必要条件.

关键词：雪旺细胞、背根神经节、坐骨神经、细胞培养、大鼠

所属期刊栏目：25

分类号：R3(基础医学)

在线出版日期：2011-04-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：166-170