人羊膜上皮细胞横向分化及脾内移植的初步研究
目的 人羊膜上皮细胞(human amniotic epithelial cells,hAECs)具有干细胞特性及分化为成熟肝细胞的潜能,有望成为肝细胞移植理想的种子细胞.研究hAECs移植入肝受损裸小鼠脾脏后的存活、迁移情况,探讨其肝细胞特性的表达. 方法 取顺产产妇自愿捐赠胎盘分离培养hAECs.30只6~8周龄裸小鼠,雌雄各半,体重20~22 g.将实验动物随机分为A、B、C 3组,每组10只.A、C组制备肝切除(常规切除2/3肝)模型,B组仪开腹但未行肝叶切除;术后A、B组分别自脾下极移植细胞密度为5 ×106个/mL腺相关病毒(adeno.associated virus,AAV)载体介导绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因标记的第3代hAECs 0.2 mL,C组注射等量生理盐水.4周后处死动物,取肝、脾、心、肺、脑、肾行大体观察,冰冻切片行组织学及免疫荧光检测,追踪hAECs存活、迁移及肝细胞特性表达. 结果 3组裸小鼠肝及脾组织未见异常癌性结节及肿块,HE染色未见肿瘤细胞.A组肝及脾组织HE染色可见大量类圆形、胞质少、核大而深染的细胞;B、C组肝、脾组织及3组肾、心、肺、脑组织均未见异常细胞.荧光显微镜下A组肝、脾组织中均发现绿色荧光信号的hAECs,且大部分表达白蛋白;B、C组肝、脾组织及3组肾、心、肺、脑组织未见绿色荧光细胞. 结论 AAV-GFP转染后的hAECs移植入肝受损裸小鼠体内可存活并保持部分肝细胞特性.
人羊膜上皮细胞、腺相关病毒、绿色荧光蛋白、细胞移植、裸小鼠
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R6(外科学)
2011-04-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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