雌激素对人表皮干细胞增殖与迁移影响的体外实验

摘要：

目的 表皮干细胞(epidermal stem cells,ESCs)在体内的微环境十分复杂,雌激素可能是主要的参与者.探讨雌激素对体外培养的hESCs增殖与迁移的影响. 方法 取自愿捐赠的正常人包皮标本,采用密度梯度离心法分离培养hESCs,并传至第2代.流式细胞仪检测第2代hESCs整合素β1、细胞角蛋白19(cytokeratin 19,CKl9)、CK14和CK10抗原表达以鉴定hESCs.取第2代hESCs 2×106个分别用含0.1 nmol/L雌激素的ESCs专用培养基(A组)、含10 nmoFL雌激素受体阻断剂的ESCs专用培养基(B组)以及普通ESCs专用培养基(C组)进行培养;于培养后24 h刮擦生长融合成片的hESCs,制各宽度为100 pan的体外单层hESCs损伤模型.于模型制备后24、48、72 h,倒置相差显微镜下观察各组表皮创面愈合情况(即hESCs迁移情况),并计算模型制备后72 h各组创而愈合率;于模型制备后24、48、72、96、120 h,采用MTT法检测hESCs分裂增殖活性. 结果 原代培养的hESCs贴壁呈单层卵圆形、集落样生长.流式细胞仪检测第2代hESCs的整合素β1、CK19、CK14呈阳性标记,阳性率分别为96.63%、95.47%、94.27%;CK10呈阴性标记,阳件率为1.32%.模型制备后24、48、72 h,各组均可见hESCs迁移越过创缘,其中A组越过创缘的细胞数多于B、C组,C组多于B组:模型制备后72 h,A、B、C组创面愈合率分别为69.00%±0.05%、35.00%4±0.05%、48.00%±0.06%,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05).模型制备后24、48、72、96和120h,A组hESCs分裂增殖活性高于B、C组,C组高于B组,差异均有统计学意义(P<0.01). 结论 雌激素具有促进hESCs分裂增殖和迁移的作用,并藉此可能参与皮肤诸多的生物学作用.

关键词：人表皮干细胞、雌激素、细胞增殖、细胞迁移、体外实验

所属期刊栏目：25

分类号：R9(药学)

资助基金：国家重点基础研究发展计划（973计划）;广东省自然科学基金

在线出版日期：2011-04-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：134-138