单核细胞趋化蛋白1体外趋化经成肌诱导分化后的小鼠BMSCs实验研究
目的 为提高BMSCs的静脉移植效率,研究单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemoattractant protein 1,MCP-1)对经成肌诱导分化后的小鼠BMSCs的体外趋化迁移作用.方法 以差速贴壁法与密度梯度离心法相结合分离培养C57/BL10小鼠BMSCs,并采用ALP Gomori改良钙钴法染色行成骨诱导鉴定.取第3代BMSCs以5氮杂胞苷(5-azacytidine,5-Aza)为诱导剂进行成肌细胞诱导分化.以不同浓度(25、50、100、200、400 ng/mL)的MCP-1对经成肌诱导分化后的小鼠BMSCs进行体外趋化迁移,计数迁移细胞数,以单纯L-DMEM培养基为对照;应用流式细胞仪检测经成肌诱导分化后的小鼠BMSCs的C-C趋化因子受体(chemokine receptor 2,CKR-2)的表达.结果 第3代细胞能诱导分化为成骨细胞,提示所用细胞为BMSCs.经成肌诱导分化后的BMSCs可形成肌小管结构.MCP-1浓度为25、50、100、200、400 ng/mL时,迁移至Millicell小室聚碳酸酯膜外层的细胞数分别为(35.0667 ±6.584 2)、(43.200 0 ±6.460 8)、(44.466 7 ±4.823 5)、(45.600 0 ±8.650 3)、(50.733 3 ±7.582 5)个,与对照组(28.333 3 ±8.9176)个比较差异均有统计学意义(P<0.05),25、50、400 mg/mL组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05).流式细胞仪检测显示,加入-抗和二抗的待测样本CKR-2表达率为48.0%,与空白对照(0.6%)和仅加入二抗的阴性对照(17.0%)比较差异均有统计学意义(P<0.001).结论 MCP-1 对经成肌诱导分化后的小鼠BMSCs有趋化迁移作用,MCP-1/CKR-2通路参与了小鼠BMSCs的迁移.
BMSCs、成肌诱导分化、单核细胞趋化蛋白1、趋化迁移作用、小鼠
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R746.2;Q813(神经病学与精神病学)
国家自然科学基金30200085
2010-11-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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