冻干组织工程骨与组织工程骨成骨活性比较研究
目的 目前组织工程骨(tissue engineered bone,TEB)缺乏有效可行的储存、运输方法.评估TEB经过冻干处理后其成骨活性变化及其异位成骨能力,探索新的TEB储存和运输策略.方法 取志愿者捐献的骨髓和骨组织分别培养hBMSCs和制备脱钙骨基质(decalcified bone matrix,DBM),取第3代hBMSCs与DBM复合构建TEB,分别于体外孵育3、5、7、9、12、15 d经过低温干燥后得到冻干组织工程骨(freeze-dried tissue engineered bone,FTEB),并将体外培养不同时间点的TEB和FTEB行扫描电镜观察.Western blot法检测TEB和FTEB内成骨相关蛋白BMP-2、TGF-β1、IGF-1的变化.将FTEB、TEB和DBM分别移植于30只6周龄BALB/C裸鼠皮下进行异位成骨实验(n=10),并行X线片评分、CT值检测以及HE染色观察.结果 扫描电镜观察示,TEB中种子细胞保持正常形态,随着培养时间的延长分泌细胞外基质逐渐增加;FTEB内的种子细胞脱水皱缩而亡,细胞外基质位于疏松的DBM支架材料中.Westernblot检测示,TEB和FTEB内BMP-2、TGF-β1和IGF-1表达均为阳性,除体外培养15 d TEB和FTEB的TGF-β1蛋白积分吸光度(IA)比值比较差异有统计学意义(P<0.05)外,其余各时间点各蛋白含量比较差异均无统计学意义(P>0.05).移植术后4周各种移植物未见明显钙化;术后8、12周,TEB和FTEB移植裸鼠皮下可以实现较好的异位成骨.通过X线片评分、CT值比较移植物钙化程度,TEB和FTEB差异无统计学意义(P>0.05),而DBM未见明显钙化.HE染色示TEB和FTEB出现钙化,DBM降解吸收.结论 FTEB与TEB具有相似的成骨活性,为TEB的储存和运输提供了一种新的策略和方法.
冻干组织工程骨、异位成骨、BMSCs、脱钙骨基质、裸鼠
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R318.08;R681.2(医用一般科学)
国家高技术研究发展计划（863计划）;国家自然科学基金;全军医学科研"十一五"计划专项资助项目;第三军医大学青年创新人才基金
2010-11-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
779-784
