NGF对人真皮成纤维细胞增殖、细胞周期、胶原合成及迁移影响的体外研究
目的 研究NGF对人真皮成纤维细胞增殖、细胞周期、胶原合成和迁移的影响,探讨NGF在创伤修复中的作用.方法 采用酶消化法体外分离培养人真皮成纤维细胞,取第3代细胞进行实验.分别加入0、25、50、100、200、400 ng/mL NGF,培养48 h采用MTT法检测细胞增殖;加入0、100 ng/mL NGF,培养48 h采用流式细胞仪分析细胞有丝分裂周期,采用羟脯氨酸法检测培养液胶原含量,实时荧光定量PeR测定细胞Col Ⅰ、Col Ⅲ mRNA表达水平:建立体外细胞划痕创伤模型,加入0、50、100、200 ng/mL NGF,培养24 h观察细胞迁移.结果 MTT法检测结果显示,各浓度组间细胞增殖的吸光度值比较差异均无统计学意义(P>0.05).在0、100ng/mL NGF作用下,细胞周期显示两组的G_0/G_1期、S期、G2/M期细胞百分率差异均无统计学意义(P>0.05),羟脯氨酸法测得两组细胞培养液胶原含量和实时荧光定量PCR测定细胞Col Ⅰ、Col Ⅲ mRNA表达水平差异均无统计学意义(P>0.05).细胞迁移实验结果显示,培养24 h后0、50、100、200 ng/mL NGF浓度组细胞迁移率分别为52.12%±6.50%、80.67%±8.51%、66.33%±3.58%和61.19%±0.97%,50、100 ng/mL NGF可显著促进细胞迁移(P<0.05).结论 NGF对人真皮成纤维细胞增殖、细胞周期及Col Ⅰ、Col Ⅲ mRNA表达无影响,不能促进胶原合成,但能促进人真皮成纤维细胞迁移.
NGF、人真皮成纤维细胞、细胞增殖、细胞周期、胶原合成、细胞迁移
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Q813;R651(生物工程学(生物技术))
四川省科技攻关项目05SG022-021;四川省科技重点项目2006Z09-019;05SG022-005
2010-01-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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1350-1354