PRP在BMSCs向SC体外分化中的作用

摘要：

目的 研究PRP对兔BMSCs在体外向SC分化中的作用,并对分化细胞的分泌功能进行检测. 方法 取2月龄新西兰大白兔骨髓5 mL,应用密度梯度离心和贴壁筛选方法 分离培养BMSCs.取兔股静脉血5 mL,采用改良Appel法制备PRP.取第3代BMSCs分为3组,联合诱导组:采用β-巯基乙醇和维甲酸序贯诱导后用含PRP完全培养基培养:单纯诱导组:行β-巯基乙醇和维甲酸序贯诱导后,采用不含PRP的L-DMEM完全培养基培养;对照组:不行诱导,仅采用L-DMEM完全培养基培养.倒置显微镜下观察各组细胞生长情况,于培养4、7、9、11 d采用免疫荧光染色法对细胞进行鉴定,ELISA法检测NGF含量,并于培养11 d行RT-PCR检测NGF mRNA表达. 结果 联合诱导组和单纯诱导组培养4 d,大部分细胞不具备BMSCs典型细胞形态结构;9 d联合诱导组细胞均不具备BMSCs典型细胞形态,呈类似SC形态和外观;对照组细胞形态一直无明显改变.联合诱导组和单纯诱导组诱导培养后,各时间点均有S-100蛋白表达;随时间延长,两组阳性表达率逐渐提高;培养7、9、11 d,联合诱导组与单纯诱导组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);对照组表达呈阴性.培养后4、7、9、11 d,NGF含量联合诱导组和单纯诱导组与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01);培养4 d联合诱导组与单纯诱导组比较,差异无统计学意义(P>0.05);培养7、9和11 d,联合诱导组与单纯诱导组比较差异均有统计学意义(P<0.05).培养11 d,NGF mRNA表达相对强度联合诱导组较单纯诱导组高,两组比较差异有统计学意义(P<0.05). 结论 兔BMSCs在体外一定条件下能诱导分化为可分泌NGF的SC;诱导培养时联合PRP能明显提高BMSCs向SC诱导的效率.

关键词：BMSCs、PRP、SC、诱导、分化、兔

所属期刊栏目：23

分类号：R651.3;Q813.11(外科学各论)

在线出版日期：2009-09-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：997-1001