同一基底材料表面不同蛋白浓度域与内皮细胞相互作用的初步研究
目的 探讨内皮细胞在同一表面具有不同蛋白浓度模板材料上的生理响应和化学趋向性,为进一步了解内皮细胞化学诱导运动性提供依据.方法 采用微接触印刷技术在同一模板上印刷4种浓度Col Ⅰ和FITC-胶原蛋白(50、100、200、300μg/mL),制备表面含有不同蛋白浓度的模板材料.扫描电镜分析聚二甲基硅氧烷(polydimethylsiloxane,PDMS)印章表面平整性和图形完整性.激光共聚焦显微镜观察不同浓度FITC-胶原蛋白在基材表面的吸附情况.荧光分析软件分析基材表面FITC-胶原蛋白域荧光强度.牛血清白蛋白封闭未吸附蛋白区域,封闭后模板材料表面接种人脐静脉内皮细胞,未吸附胶原蛋白基材作为对照组.MTT法检测不同浓度胶原在接种6、24、48、72 h对人脐静脉内皮细胞增殖能力的影响;激光共聚焦显微镜检测初始黏附期细胞骨架铺展状况;单个细胞轨迹测量法测量内皮细胞培养24 h后的迁移速率和净位移.结果 PDMS印章表面平整且图形完整.模板材料表面蛋白域完整,蛋白域内荧光强度均匀,50、100、200、300.μg/mL FITC-胶原蛋白在基材表面吸附的荧光强度分别为38.51±1.63、55.21±3.88、73.17±3.59、80.95±1.12.不同浓度蛋白域内皮细胞骨架铺展较对照组充分.各浓度组内皮细胞增殖能力和净位移均强于对照组(P<0.05);随浓度增加,内皮细胞增殖能力和净位移增强(P<0.05).除300μg/mL浓度组外,各浓度组细胞迁移速率均小于对照组(P<0.05):各浓度组间随浓度增加,内皮细胞迁移速率增大(P<0.05).结论 利用微接触印刷技术在同一基材表面可获得不同蛋白浓度域,用于细胞化学趋向性研究.
血管组织工程、微接触印刷技术、胶原、人脐静脉内皮细胞
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R318;Q813(医用一般科学)
国家自然科学基金;教育部留学回国人员科研启动基金
2009-06-19(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共6页
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