新型抗冻剂海藻糖对低温保存皮肤组织α-辅肌动蛋白表达的实验研究
目的 比较海藻糖与传统低温保护剂对皮肤组织a-辅肌动蛋白(a-actinin)低温保存后表达的影响,进一步揭示海藻糖的低温抗冻机制.方法 实验共进行6次,每次取自愿捐献烧伤患者整形术后所余大腿部刃厚皮片5块,根据冻存时添加保存液不同,将皮片随机分为5组,每组各1块.T/D组:添加0.5 mol/L海藻糖/DMSO,完全浸没皮片;D/P组:DMSO/丙二醇;D/K组:DMSO/无血清角质细胞培养基;DMEM组:DMEM;置于-196℃液氮中储存14 d后复温进行实验;对照组:刃厚皮片不作任何处理.对各组皮片进行免疫组织化学染色观察,RT-PCR方法 检测皮片a-actinin基因水平,皮肤内琥珀酸脱氢酶(succinate dehydrogenase,SDH)定量测定法检测皮肤活力.结果 对照组、T/D组、D/P组、D/K(组及DMEM组吸光度(A)值分别为27.50±7.92、18.40±5.81、13.10±5.11、11.50±4.54及5.30±2.14.对照组与T/D组比较差异无统计学意义(P＞0.05),与其他组比较差异均有统计学意义(P＜0.05).RT-PCR检测对照组、T/D组、D/P组、D/K组及DMEM组a-actinin基因表达A值分别为0.816±0.134、0.723±0.245、0.564±0.265、0.245±0.071及0.148±0.048.对照组与T/D、D/P组比较,差异无统计学意义(P＞0.05);与D/K、DMEM组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).对照组、T/D组、D/P组、D/K组及DMEM组SDH活性值分别为18.2±3.7、12.3±3.6、10.2±2.4、7.3±2.1及5.7±1.5.对照组与T/D组比较差异无统计学意义(P＞0.05),与其他组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 海藻糖对低温保存皮肤组织a-actinin的保护作用在其抗冻机制中发挥了重要作用.
海藻糖、皮肤、α-辅肌动蛋白、低温保护剂
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R313;R322.99(医用一般科学)
国家自然科学基金资助项目30070298、30672177;首都医学发展科研基金资助项目2005-3087
2008-07-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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