雪旺细胞促进骨髓间充质干细胞增殖的实验研究
目的 通过雪旺细胞(Schwann cell, SC)与骨髓间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells, MSCs)复合培养,观察SC对MSCs增殖的影响,为其在构建组织工程血管中应用提供实验依据.方法 选用体重40 g SD大鼠,用组织块培养法获取SC,用骨髓差速贴壁法获取MSCs;用免疫组织化学法分别对两种细胞进行鉴定.用Transwell培养板复合培养两种细胞,实验组于板上层接种MSCs,下层接种SC;同时上下两层均接种MSCs设为对照组.各组均选择第1、3、5和7天4个时间点进行检测, 用氚标胸腺嘧啶核苷酸标记MSCs,液体闪烁仪进行细胞计数(counts per minute, CPM).提取实验组SC、MSCs和对照组MSCs的细胞蛋白,分别对血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)和其受体Flk-1, 协同受体1(neuropilin-1, NRP-1)进行Western blot检测. 结果 SC呈梭形,表达S-100蛋白,阳性率达90%.MSCs表达CD105和CD 44,不表达CD 34和CD 45.Transwell复合培养:MSCs,第1、3、5和7天增殖数量分别为2 411.00±270.84、3 016.17±241.57、6 570.83±2 848.27、6 375.83±1 431.28,明显大于对照组2 142.17±531.63、2 603.33±389.64、2 707.50±528.55、2 389.00±908.01,差异有统计学意义(P＜0.05),实验组CPM值于第5天最高.于复合培养第5天Western blot显示:SC表达VEGF、Flk-1和NRP-1;VEGF、Flk-1、NRP-1在实验组MSCs中表达明显强于对照组. 结论 两种细胞体外复合培养后,SC在第1、3、5和7天均能显著增加MSCs的数量,并促进增殖,增殖高峰在第5天.与SC复合培养后,MSCs表达VEGF明显增加,其相应受体Flk-1、NRP-1表达上调,SC通过促进MSCs分泌VEGF增加参与了细胞的增殖过程.
雪旺细胞、骨髓间充质干细胞、复合培养、细胞增殖
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R318;Q813(医用一般科学)
国家自然科学基金30370390
2007-09-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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