D-半乳糖对大鼠骨髓间充质干细胞拟衰老作用的实验研究

摘要：

目的探讨D-半乳糖(D-galactose, D-gal) 诱导SD大鼠骨髓间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells, MSCs)衰老后的形态学及生物学变化情况.方法取3只2月龄SD大鼠MSCs分离培养至第3代,一部分置于含8 g/L D-gal的培养液中继续培养至第6代作为诱导组;另一部分在原培养液中继续培养至第6代作为对照组,并作表型鉴定.采用流式细胞仪检测对照组加入8 g/L D-gal后4 d内细胞周期的分布变化.两组MSCs培养7 d并绘制生长曲线,在光镜和透射电镜下观察其形态和结构变化,β-半乳糖苷酶染色、单细胞凝胶电泳检测DNA损伤方法检测其衰老后的生物学行为变化.结果诱导组MSCs镜下呈典型的衰老细胞形态;对照组MSCs形态均匀,长势良好.流式细胞仪检测表明加入D-gal诱导后90% MSCs停留在G0/G1期,而S期和G2/M期MSCs趋于消失,并随诱导时间延长趋势越明显;对照组MSCs各期比例正常.MSCs生长曲线示诱导组生长速度较对照组明显减慢.诱导组约85%呈β-半乳糖苷酶阳性染色,对照组染色为阴性.单细胞凝胶电泳示诱导组MSCs DNA有拖尾现象,对照组MSCs无DNA损伤.结论 D-gal对SD大鼠MSCs的老化具有诱导作用,初步推断8 g/L为最适浓度,为研究MSCs衰老提供了较好的模型.

关键词：D-半乳糖、骨髓间充质干细胞、细胞衰老、大鼠

所属期刊栏目：20

分类号：R318;Q813(医用一般科学)

在线出版日期：2006-05-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：475-479