胚胎面突外胚间充质细胞的培养鉴定及向平滑肌细胞的自分化研究
目的探讨胚胎面突外胚间充质细胞在体外的生长特性、表型特征及在无分化抑制剂-白血病抑制因子(LIF)的DMEM/F12培养基中向平滑肌细胞自分化的过程. 方法取孕50天人胚面突,用消化法培养获得外胚间充质细胞,倒置显微镜下观察细胞形态和生长情况,免疫组织化学鉴定细胞分化表型.用无LIF的DMEM/F12培养基培养,2天后进行抗α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)单克隆抗体免疫组织化学检测,通过RT-PCR在mRNA水平检测α-SMA的表达,透射电镜观察细胞超微结构. 结果培养的细胞呈单层生长,成纤维状,长梭形,有2~4个突起,抗人自然杀伤细胞标志、波形丝蛋白、S-100蛋白、神经元特异性烯醇化酶、肌红蛋白及Ⅷ因子染色阳性,抗神经胶质纤维酸性蛋白、神经纤维细丝蛋白、α-SMA、角蛋白染色阴性.去除LIF 2天后,抗α-SMA免疫组织化学检测呈阳性,RT-PCR显示细胞在RNA水平表达平滑肌细胞特异的α-SMA,透射电镜可见超微结构与平滑肌细胞相类似. 结论所获得的外胚间充质细胞具有干细胞特性.在无分化抑制剂存在时,面突外胚间充质细胞呈明显向平滑肌细胞的自然分化.
胚胎、外胚间充质细胞、平滑肌细胞、培养、分化
17
R78(口腔科学)
第四军医大学校科研和教改项目CX02F002
2003-10-31(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共5页
391-395